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hla分型法亲子鉴定(HLA如何用于亲子鉴定)

0 次浏览 编辑 基因细胞服务中心
2023-01-28 16:21:40


HLA细胞法分型试验是怎样的?

  单向MLC是将刺激细胞用丝裂霉素C(mitomycinC)或X线照射先行灭活,但细胞的抗原性保持不变,因此可作为刺激细胞而不能作为反应细胞,试验结果是待检测细胞的反应,使于结果分析。
SI=试验管cpm/自身对照cpm
单向MLC可以用来进行HLD-D和DP位点的分型试验,常用的方法有两类:纯合子分型细胞(homozygoustypingcell,HTC)试验和预敏淋巴细胞分型(primedlymphocytetyping,PLT)试验。



什么HLA抗原分?什么HLA抗原分型

HLA分型技术主要组织相容性复合物(MHC)是脊椎动物体内最复杂且具有高度多态性的基因群。1984年George Snell 首次发现小鼠MHC即H-2,1958年Dausset 发现了人的MHC即HLA基因。MHC的表达产物称为主要组织相容性抗原,MHC抗原是有核细胞表面膜蛋白分子,对抗原递呈和免疫信号传递起关键作用。



网友:hla分型法亲子鉴定

大家好。平常我们在体检中会去做抽血这一项,大家有没有注意到每次抽血管的颜色不一样,并且抽血量也不一样。大家是不是很好奇呢?今天我为大家解读一下心中的疑虑。

红 管:添加剂为血凝催化剂,适用的检测范围是 临床生化,临床免疫学检测,交叉配血。

深黄色管:血清分离管里面包含分离胶。适用于临床生化,临床免疫加测。

绿 色:肝素锂抗凝管 ,适用检测范围,血氨、血液流变学检测

棕 色 : 里面包含肝素钠,适用于临床生化检测,细胞遗传学检测。

紫 色:EDTA-K2 适用于血液学检测,交叉配血。

灰 色:添加剂为氰化物、抗凝剂 适用于葡萄糖检测

浅蓝色:添加剂为柠檬酸钠1:9 适用于凝血功能、血小板功能检测

黑 色:添加剂为柠檬酸钠1:4 检测范围:红细胞沉降率检测

黄 色:添加剂为柠檬酸、葡萄糖 适用于:HLA组织分型、亲子鉴定、DNA鉴定。

深蓝色:添加剂乙二酸四乙酸 适用于:微量元素检测。

以上就是大家常见的几种类型。大家点击关注,以后还会有更多的知识点分享给大家。

大家还有想知道的评论区告诉我。谢谢大家~~~

血型是人类血液的主要特征之一。从1900年Karl Landsteiner发现人类第一血型系统ABO血型至今,目前国际输血协会(The International Society of Blood Transfusion ,ISBT)已确认了39个红细胞血型系统,360多个血型抗原。但是ABO血型是具有重要临床意义的人类红细胞血型系统,涉及临床安全输血、器官移植、法医鉴定和人类学等领域。ABO血型虽然检测方法简单,但是遗传非常复杂。我们在临床患者及献血员样本中经常会发现疑难样本,很难给出明确血型。也经常在亲子鉴定咨询中会有人问到:“大夫,能给做血型吗?我发现孩子血型不对,我和孩子母亲的血型一个是AB型,一个是O型,孩子血型能是AB型吗?”

正常情况下,AB型和O型父母,遗传给孩子的血型应该是A型和B型。极少情况下,也有遗传给孩子AB型和O型。因为ABO血型系统中还有一种罕见血型cisAB和B(A)型,它是一条等位基因同时能够表达A抗原和B抗原。在遗传上表现为cisAB和B(A)血型与O型婚配可以生出AB型和O型的子女。如果A抗原强于B抗原,就是cisAB型;如果B抗原强于A抗原,就是B(A)型。cisAB和B(A)型与AweakB型,或者ABweak型血清学上很难区分,需要用分子生物学检测技术加以辅助检测。

cisAB表现型在l964年报道发现,是较为罕见的ABO血型,人群发生频率非常低,大约在170 000到580 000之间。目前国际上报道了7种cisAB等位基因:cisAB*01-07,cisAB*07等位基因由我们辽宁省血液中心首次发现并鉴定。在1名献血员ABO血型血清学鉴定中发现异常,采用基因测序技术发现为新等位基因。征得该献血员知情同意后,进行家系调查。该献血员的父亲血型cisAB型,母亲血型O型,该献血员为cisAB型(见图2)。同时我们在约10万例大样本调查中,发现36例cisAB和B(A)型,其中患者20例,献血员16例。

该献血员ABO血型家系调查(箭头所指为该献血员)

如果cisAB和B(A)型患者或者孕妇紧急情况需要输血时,很难找到完全相合的血液,建议输注O型红细胞和AB型血浆。

【本期专家】

章旭,辽宁省血液中心(沈阳中心血站)主任技师,硕士研究生。担任中国输血杂志编委,辽宁省医学会输血分会青年委员,辽宁省细胞生物学学会输血医学专业委员会理事。主要从事输血医学、分子生物学、医学免疫学和法医鉴定等研究工作;熟练掌握血型分子生物学研究技术、DNA测序技术、分子克隆技术、基因转染和体外表达等技术;具有丰富的血型血清学、临床输血、HLA基因分型和法医鉴定等工作经验和专业知识。

刘桦孕中时一家合影。

咚咚即将进行脐带血干细胞移植治疗。

红网时刻10月19日讯(通讯员 胡晓 洪雷 张莹)10月16日,整整担心了4年的刘桦(化名)脸上终于露出了轻松的笑容。她的大儿子此刻咚咚(化名)躺在封闭的移植仓中,体内的中性粒细胞和血小板正逐渐恢复正常。大约10天后,他将彻底摆脱“重型β地中海贫血”带来的恐惧与威胁。而拯救他的,则是刚刚出生1个月的妹妹。

因为接受了中信湘雅生殖与遗传专科医院和湖南光琇医院联合进行的PGD-HLA配型出生妹妹的脐带血干细胞治疗,这个重型β地中海贫血患儿即将迎来新生。

命运:来自地贫携带父母的基因,让他成为重型β患者

刘桦和丈夫高钟(化名)来自于四川宜宾。2014年,他们相爱结婚了,第二年就生了一个可爱的男孩儿。可是,在孩子有6个月时,刘桦发现,怎么他的咳嗽怎么也治不好。

经过血相检查,医生怀疑孩子患有贫血,进一步基因检测发现他的HBB基因存在IVS-II-654(C>T)及CD43(G>T)复合杂合突变,是重型β地贫患者。这两个基因突变分别遗传自爸爸和妈妈!

“当我们得知这个结果时,人都是懵的,心就像掉进了万丈深渊。”刘桦回忆说。从那天起,她就带着孩子踏上了迷茫的求医之路,而这期间,孩子还需要定期接受输血和除铁治疗,那是一笔不小的费用,在接下来的4年中,成为这个家庭沉重的经济及心理负担。

救赎:“我们需要一份跟孩子HLA相配的造血干细胞”

“我们走访了多家医院,都被告知对于重型β地贫患者而言,造血干细胞移植是目前根治这一疾病的有效方法。如果能找到HLA相配的造血干细胞供者,治愈孩子就有希望了。”

在骨髓库等待HLA全相合的供者少则1年,多则5年,且移植后有较大的排异反应,不是刘桦的首选。亲子间的半相合移植,虽然有成功的案例,但是夫妻俩不想冒险,也没有考虑。最后他们倾向于为孩子生育一个HLA相合的同胞,从同胞脐血中采集造血干细胞进行治疗。

科普:造血干细胞移植可分为骨髓移植、外周血干细胞移植和脐血干细胞移植。其中,脐带血是指胎儿娩出断脐后最短时间从脐静脉中采集的血液,有免疫原性低、对配型要求低、取用方便等优势。

科学:3/16的几率 胚胎植入前遗传学诊断和试管婴儿技术给命运带来希望

“2018年6月,刘桦来到中信湘雅生殖与遗传专科医院咨询第三代试管婴儿。

“理论上我们有3/16的概率通过胚胎植入前遗传学诊断(PGD)帮助他们生育无患病风险且HLA配型相符的孩子,虽然听起来概率比较低,但在评估了她的生育条件后,我们认为还是很有希望的。”中信湘雅遗传门诊副主任医师胡亮介绍道。

2018年8月,刘桦取了10个卵,最后形成6个囊胚。技术人员在显微镜下,从每个胚胎的外胚滋养层中取走了3-5个细胞进行遗传学检测。结果显示,6个胚胎中,有4枚为β地贫携带者,1枚正常,1枚β地贫患者。同时,HLA基因分型显示,其中有一枚携带者胚胎的HLA与哥哥相合,希望有了!”

“地贫携带者自己不会发病,孩子长大了,虽然其后代仍有生育地贫患者的风险,但届时也可以通过遗传门诊来进行诊断排除。”

2019年1月,这枚饱含希望的胚胎被送进了刘桦的子宫里。刘桦妊娠成功了。

成功:脐血+外周血,一袋健康的造血干细胞流入哥哥的体内

2019年4月,经中信湘雅产前诊断,医生进一步确认了刘桦腹中的孩子HLA基因型与哥哥全相合,虽然HBB基因存在IVS-II-654(C>T)杂合突变,但没有患病风险),与此前PGD诊断相符。

经过10个月翘首等待,2019年9月12日,咚咚的妹妹出生了。在爸爸妈妈眼里,这是个天使般的女孩,为咚咚送来了120ML脐带血,咚咚当天就进行了脐带血干细胞移植治疗。

2019年10月16日,移植后的第34天,哥哥还住在移植舱,中性粒细胞和血小板还有些偏低,但正在不断恢复,大约10余天后就可以出仓回家了。

湖南首例β地贫+HLA配型移植成功为众多遗传疾病家庭带去希望

脐血干细胞移植目前多用于血液肿瘤、血液系统和免疫系统遗传性和非遗传性疾病。以重度β地贫为例,要寻找合适的供者进行干细胞移植,并非易事。

通过辅助生殖与植入前诊断技术选择生育HLA基因型匹配的健康孩子,采集其脐带血为患者提供造血干细胞治疗,为这类疾病的治疗提供了一种全新的可行方案。而此次移植的最终成功,也为这一方案提供了最有力的现实依据。

“通过β地贫病例,我们搭建了辅助生殖与脐血干细胞制备、干细胞移植治疗等多学科合作平台,为寻求造血干细胞移植的家庭提供了一个更有效和可靠的选择。”中信湘雅遗传部副主任杜娟介绍。

10月17日,我国著名生殖医学与医学遗传学领域专家卢光琇教授介绍,中信湘雅生殖与遗传专科医院联合湖南光琇医院开展的首例PGD-HLA配型无β地中海贫血患病风险的宝宝,已于2019年1月9日顺利诞生。这个健康女宝宝的脐带血现保存在人类干细胞国家工程研究中心-196℃的液氮中,随时听候她患有β地中海贫血的哥哥姐姐需要。

截至目前,两家医院已为6个β地中海贫血家庭开展单细胞PGD-HLA配型检测20次。其中,有5个家庭筛选到无患β地中海贫血风险、其HLA与β地中海贫血患儿完全匹配的胚胎各1枚。

这5个家庭的命运将被彻底改变。有2个家庭已顺利生下健康宝宝(咚咚已开展脐带血造血干细胞移植,目前即将治愈出仓;另一宝宝脐带血被免费储存在人类干细胞国家工程研究中心干细胞库内);还有2个家庭已成功妊娠,1个家庭正在胚胎移植前的准备阶段。

“相信将来,这项技术会服务于更多家庭,为他们摆脱命运的不公。”

背景:遗传性地中海贫血湖南省人群携带率约为1/10-20

中信湘雅遗传中心副主任杜娟教授介绍,地中海贫血是一组严重威胁人类健康的致死、致残的遗传性血液病,由于早期报道的病例几乎都来源于地中海地区,故被命名为地中海贫血,简称地贫。

经调查,地中海贫血在地中海沿岸国家、热带和亚热带地区,如东南亚地区、中东、印度次大陆和中国南方均为高发地区。

中国南方人群地贫基因缺陷携带率为1%-23%,其中,广西是我国地贫发生率最高的省份,地贫基因携带率为1/4-5,重型地贫新生儿出生率为1/200-250。湖南省地贫基因携带率也高达1/10-20。

杜娟教授介绍,地中海贫血呈常染色体隐性遗传。若夫妇双方均为携带者(突变杂合子),则双方有1/4概率出生中/重型地贫患儿,1/4概率出生正常个体,2/4概率出生杂合子(轻型患者)。

“也就是说,一个夫妻双方均为地中海贫血的家庭,仅有25%的几率出生健康的孩子,50%的几率生育轻型患者,有25%的几率生育重型地贫患儿。”杜娟教授说。


hla分型法亲子鉴定(HLA如何用于亲子鉴定)

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